CULTURA DE TECIDOS DO GUACO (Mikania glomerata):PROTOCOLOS INICIAIS PARA A CULTURA IN VITRO

Abstract

A biotecnologia engloba um conjunto de técnicas desenvolvidas em organismos vivos visando fazer ou modificar produtos em laboratório e promover o melhoramento de plantas ou animais. Estudos envolvendo técnicas biotecnológicas em plantas medicinais são bastante amplos, com destaque a cultura de tecidos e transformação genética. Assim estabelecer protocolos iniciais para o cultivo in vitro de células vegetais de guaco, é de grande relevância, pois, incrementará esta área da Biotecnologia de ponta no país e possibilitará a síntese de substâncias de interesse farmacêutico, o que é inviável por processos químicos convencionais. Foram utilizadas gemas axilares de plantas cultivadas, submetidas a limpeza prévia com detergente neutro, água corrente e álcool 70°GL, e posteriormente limpas em câmara de fluxo laminar utilizando-se hipoclorito de sódio a 2,5% de cloro ativo durante 30 minutos. Após foram lavadas com água destilada. Posteriormente forram inoculadas individualmente em tubos de ensaio, contendo meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962), suplementado com 3 % de sacarose e solidificado com 0,2% de Phytagel^TM), adicionado de 0,3% de carvão ativo. As culturas foram mantidas em sala de crescimento, por 40 dias, com temperatura de 25°C, sob fotoperíodo de 16 horas, com intensidade luminosa de 22.3μmol.m^-1.s^-1, e umidade relativa de 70%.Os segmentos nodais resultantes das brotações das gemas isoladas, e contendo 2 gemas axilares, foram inoculadas no meio de cultura, acrescido de diferentes quantidades de BAP (6-benzilaminopurina) nas concentrações de 0.0 mg/L^-1 a 1.0 mg/ L^-1. As plantas mais bem adaptadas foram retiradas do meio in vitro e aclimatadas em substrato ainda na sala de crescimento e em seguida levadas a campo para a aclimatação. O isolamento apresentou um índice de contaminação de 50%, em relação aos efeitos do BAP a melhor concentração foi a de 0,5 mg/L que apresentou um comprimento médio de 2,68cm e brotação média de 1,28 brotos por planta seguida da concentração de 0,3mg/L com comprimento médio de 2,50cm com 1,25 brotos por planta  e na aclimatação o resultado foi excelente com o índice de 70% de sobrevivência.